Експериментальні польові вольєри

 

Побудовані з відносно простих матеріалів.

Розміри. 1м х 0.67м х 0.67м

Ми використали хімічно не оброблену деревину туї, стійку до дії комах і погодних факторів.

Дротова сітка з вічком 0.64 см.

Поверх, що відчиняється, для легкого доступу.

Розміщені в одному із самих радіоактивних природних регіонів світу.

Застосування в польових умовах традиційної лабораторної модельної системи - хатньої миші (Mus domesticus)

 

Джеффрі К. Віккліфф1, Бренда І. Роджерс1, Рональд К. Чессер1,3, Карлетон Дж. Філліпс1, Сергей Гащак3, Ігор Шохалевіч4, Ігор Чіжевский4 і Роберт Дж. Бейкер1,2

1Texas Tech University, Лаббок, Техас, США

2Дослідницька лабораторія природніх наук, Лаббок, Техас, США

3Міжнародна радіоекологічна лабораторія, Славутич, Україна

4Чорнобильський науково-технічний центр міжнародних досліджень, Чорнобиль, Україна

Утворення мікроядер

Індукція утворення мікроядер у Big Blue®

20,000 ретікулоцитів було проаналізовано для кожної особі (n=8)

Підрахунок клітин здійснювався з використанням microflow™ цитометричної системи аналізу

Біологічна система

Були використані лабораторні модельні системи - 3 лінії Mus domesticus, гемізіготні Big Blue®::

  • BALB/c

  • C57BL/6

  • Трансгенні

Стандартна лабораторна годівля ad libitum. Забезпечення водою ad libitum.

В усіх групах мишей відбувалося внутрішнє накопичення радіонуклідів, у помітних концентраціях.

Доза опромінення і накопичення радіоцезію оцінені за допомогою вимірів активності всього тіла.

Гетероплазмія мітохондріальної ДНК

Зроблені по два відбори проб від кожної особини (n=28)

0-ва доба - до розміщення тварин у вольєри (контроль)

39-та доба - субхронічне опромінення

Гетероплазмія мітохондріальної ДНК оцінена для 400 пар основаній гену цитохрома b. 50 копій гену на особину.

За результатами аналізу 80000 пар основаній не виявлено жодної мутації (n=4 [n=2 субхронічне опромінення])

lacI трансгенний аналіз

Рекомендовано таку схему аналізу за методом "блакитних бляшок":

Криві зростання демонструють внутрішнє накопичення радіоцезію (134,137Cs) у мишей в вольєрах.

Величина дози виражена в мілігреях (мГр)

 

  • Введення геномної трансгенної ДНК від 5 мишей в геном лямбда-бактеріофагу
  • Титрування реакції впливу бактеріофагів на E. coli
  • Тестування трансгенних мишей на наявність мутацій методом "блакитних бляшок" з використанням системи SCS-8 аналізу

Рівень мінісателітних мутацій

Southern аналіз сімей, що утворилися у вольєрах

  • 3 мінісателітних теста (Jeffreys)
  • HM-1, HM-2, MMS-10 (мультілокус)
  • Виділена від батьків і їхніх дітей геномна ДНК була оброблена AluI
  • Тести були успішно промарковані і гібридизовані

 

Подяка

Міністерство Енергетики США

Міжнародна радіоекологіческая лабораторія, Україна

Міністерство з Питань Надзвичайних Ситуацій, Україна

Texas GAP Analysis Program, Wildlife and Fisheries Coop Unit, США

 

  [home]  [English]  [Russian] [Ukrainian]