Экспериментальные полевые вольеры

Построены из относительно простых материалов.

Размеры: 1м x 0.67м x 0.67м

Мы использовали химически не обработанную древесину туи, устойчивую к воздействию насекомых и погодных факторов.

Проволочная сетка с ячейкой 0.64 см.Открывающийся верх для легкого доступа.Размещены в одном из самых радиоактивных природных регионов мира.

Применение в полевых условиях традиционной лабораторной модельной системы – домовой мыши (Mus domesticus)

 

Джеффри К. Викклифф1, Бренда И. Роджерс1, Рональд К. Чессер1,3, Карлетон Дж. Филлипс1, Сергей Гащак3, Игорь Шохалевич4, Игорь Чижевский4 и Роберт Дж. Бейкер1,2

1Texas Tech University, Лаббок, Техас, США

2Исследовательская лаборатория природных наук, Лаббок, Техас, США

3Международная радиоэкологическая лаборатория, Славутич, Украина

4Чернобыльский научно-технический центр международных исследований, Чернобыль, Украина

Образование микроядер

Индукция образования микроядер у Big Blue®

20,000 ретикулоцитов проанализировано для каждой особи каждой особи (n=8)

Подсчет клеток осуществлялся с использованием microflow™ цитометрической системы анализа

Биологические системы

Были использованы лабораторные модели системы 3 линииMus domesticus , гемизиготные Big Blue®:

  • BALB/c

  • C57BL/6

  • Трансгенные

Стандартное лабораторное кормление ad libitum. Обеспечение водой ad libitum.

Во всех группах мышей происходило внутреннее накопление радионуклидов в измеряемых концентрациях.

Доза облучения и накопление радиоцезия оценены с помощью измерения активности всего тела

Гетероплазмия митохондриальной ДНК

Сделаны по два отбора проб от каждой особи (n=28)

0-вые сутки – до помещения животных в вольеры (контроль)

39-ые сутки – субхроническое облучение

Гетероплазмия митохондриальной ДНК оценена для 400 пар оснований гена цитохрома b. 50 копий гена на особь.

По результатам анализа 80000 пар оснований не обнаружено ни одной мутации (n=4 [n=2 субхроническое облучение])

LacI трансгенный анализ

Рекомендована следующая схема анализа методом "голубых бляшек":

Восходящие кривые, демонстрирующие внутреннее накопление радиоцезия (134,137Cs) у мышей в вольере.

Величина дозы выражена в миллигреях (мГр)

 

  • Внедрение геномной трансгенной ДНК от пяти мышей в геном лямбда-бактериофага
  • Титрование реакции воздействия бактериофагов на E. coli
  • Тестирование трансгенных мышей на наличие мутаций методом "голубых бляшек" с использованием системы SCS-8 анализа.

Уровень минисателлитных мутаций

Анализ семей, образовавшихся в вольерах,  по-Саузерну, 

  • 3 минисателлитных теста (Jeffreys)
  • HM-1, HM-2, MMS-10 (мультилокусы)
  • Выделенная от родителей и их потомства геномная ДНК была обработана AluI
  • Тесты были успешно промаркированы и гибридизированы

 

Благодарность

Министерство Энергетики США

Международная Радиоэкологическая Лаборатория, Украина

Министерство по Черезвычайным Ситуациям, Украина

Texas GAP Analysis Program, Wildlife and Fisheries Coop Unit, США

 

  [home]  [English]  [Russian] [Ukrainian]